色譜柱正向使用反向沖洗優勢和原理

先說說柱子能不能反沖的問題，色譜柱到底能不能反沖？如果色譜柱兩端的篩板孔徑相同反沖是不會有什么問題的，從填料流失的角度來說，粒徑為5um，而篩板孔徑為2um，這種情況下正沖反沖都不會造成填料的流失；此外，從柱子裝填的角度來說，裝柱時是按照與柱身箭頭相反的方向裝填的，與反沖時的液體流路方向相同，裝柱時那么高的壓力（通常大于40MPa）下用頂替液沖刷都沒有問題，難道區區1ml/min流速下的十幾個MPa會造成柱床松動？更何況反沖時通常用的要么是90％水、要么是90％或純的有機相，這么低的壓力又能對柱床造成什么樣的損傷？還有，填料的C18長鏈是鍵合在裸硅膠上的，碳鏈的自由舒展對分析是zui有利的，不是說你長期朝一個方向使用碳鏈就像水草一樣朝一個方向倒，用甲醇或乙腈等沖洗之后它會回復自由舒展狀態的，即使它們確實朝一個方向倒，那么反向沖洗讓它們恢復一下初始狀態豈不是更好？所以我認為反向沖洗不會對柱床造成影響。

那哪些柱子不能反向沖洗呢？我認為有兩種是不能反向沖洗的，一種是兩端篩板不一樣不宜進行反沖操作，因為入口端篩板孔徑大一些會比較能耐固體顆粒物質的堵塞，至少被堵的時間會相對較長，這種情況下一旦反沖就有可能造成填料的流失，導致柱效下降。另一種是有柱頭塌陷的色譜柱不宜反沖，因為柱頭塌陷了在柱頭上留下空間，反沖會導致柱床移動，填料松動、重新分布，但這種柱子您認為還能使用嗎？柱頭塌陷意味著柱頭前面造成比較大的死體積，峰形只怕是早就變樣了，您還能指望用這樣的柱子進行分析？所以對這種柱子而言反不反沖已經沒有任何意義了，因為它已經是根廢柱子。